Die Fluoreszenz- in-situ -Hybridisierung (FISH) ist eine von mehreren Techniken, mit denen die DNA Ihrer Zellen nach dem Vorhandensein oder Fehlen bestimmter Gene oder Genteile durchsucht
Viele verschiedene Krebsarten sind mit bekannten genetischen Anomalien verbunden. Und mit genetisch meinen wir nicht nur Vererbung. Im Laufe des Lebens können Zellen bei der Teilung und beim Wachstum Fehler machen. In diesen Zellen können sich Mutationen in der DNA ansammeln, die mit Krebs in Verbindung stehen.
Inhaltsverzeichnis
Wie es funktioniert
FISH ist eine Technik, die fluoreszierende Sonden verwendet, um bestimmte Gene oder Teile von Genen (DNA-Sequenzen) zu erkennen. Laborpersonal und Onkologen in medizinischen Zentren verwenden FISH, um Patienten zu untersuchen, die möglicherweise an Krebs erkrankt sind, und manchmal auch, um einen Patienten zu überwachen, bei dem bereits Krebs diagnostiziert und behandelt
Je nach Ort und Art der vermuteten Krebserkrankung kann eine FISH-Untersuchung mit unterschiedlichen Proben durchgeführt werden: Tumorzellen aus dem peripheren Blut, aus einer Knochenmarkbiopsie oder einer Lymphknotenbiopsie und formalinfixiertes, paraffineingebettetes Gewebe (dabei handelt es sich um eine Gewebeprobe, die im Labor verarbeitet und in eine Art Wachs eingebettet wird, wodurch sie steifer wird und in dünne Scheiben geschnitten und zur Betrachtung unter dem Mikroskop vorbereitet werden kann).
Was die Buchstaben bedeuten
Das „H“ in FISH steht für Hybridisierung. Bei der molekularen Hybridisierung wird eine markierte DNA- oder RNA-Sequenz als Sonde verwendet – stellen Sie sich einen roten Legostein vor. Die Sonde wird verwendet, um in einer biologischen Probe einen entsprechenden Legostein oder eine DNA-Sequenz zu finden.
Die DNA in Ihrer Probe ist wie ein Stapel Legosteine, und die meisten Steine in diesen Stapeln passen nicht zu unserer roten Sonde. Und alle Ihre Steine sind ordentlich in 23 Stapelpaare angeordnet – jeder Stapel ist mehr oder weniger eines Ihrer gepaarten homologen Chromosomen. Anders als Legosteine ist unsere rote Legosonde wie ein starker Magnet und findet sein Gegenstück, ohne die Stapel durchsuchen zu müssen.
Das „F“ steht für Fluoreszenz. Unsere rote Sonde könnte in den Ziegelstapeln verloren gehen, deshalb ist sie mit einem fluoreszierenden Farbstoff markiert, damit sie leuchtet. Wenn sie unter den 23 gepaarten Stapeln ihr Gegenstück findet, zeigt eine fluoreszierende Markierung ihren Standort an. Sie können jetzt also sehen, wie Forscher und Kliniker FISH verwenden könnten, um herauszufinden, wo (in welchem Stapel oder auf welchem Chromosom) sich ein bestimmtes Gen bei einem bestimmten Individuum befindet.
Das „I“ und das „S“ stehen für in situ . Damit ist gemeint, dass unser roter Legostein sein Gegenstück in der von Dir vorgegebenen Probe sucht .
FISH und bestimmte Blutkrebsarten
FISH und andere In-situ -Hybridisierungsverfahren werden zur Diagnose einer Vielzahl von Chromosomenanomalien eingesetzt – Veränderungen im genetischen Material, Veränderungen in Chromosomen, darunter die folgenden:
- Deletion: Ein Teil eines Chromosoms ist verschwunden
- Translokation: Ein Teil eines Chromosoms bricht ab und bleibt an einem anderen Chromosom haften.
- Inversion: Ein Teil eines Chromosoms bricht ab und wird in umgekehrter Reihenfolge wieder eingefügt.
- Duplikation: Ein Teil eines Chromosoms ist in zu vielen Kopien innerhalb der Zelle vorhanden.
Jede Krebsart kann ihre eigenen Chromosomenveränderungen und entsprechenden Sonden aufweisen. FISH hilft nicht nur dabei, die ersten genetischen Veränderungen bei einem Krankheitsprozess wie Krebs zu identifizieren, sondern kann auch verwendet werden, um die Reaktion auf die Therapie und die Remission der Krankheit zu überwachen.
Die durch FISH festgestellten genetischen Veränderungen liefern manchmal zusätzliche Informationen darüber, wie sich der Krebs einer Person wahrscheinlich verhalten wird, basierend auf Beobachtungen, die in der Vergangenheit bei Menschen mit derselben Krebsart und ähnlichen genetischen Veränderungen gemacht wurden. Manchmal wird FISH auch nach der Diagnose eingesetzt, um zusätzliche Informationen zu erhalten, die dabei helfen können, den Ausgang des Patienten oder die beste Behandlung vorherzusagen.
Mithilfe von FISH können Chromosomenanomalien bei Leukämien , einschließlich der chronischen lymphatischen Leukämie (CLL) , identifiziert werden . Bei chronischer lymphatischer Leukämie/kleinzelligem Lymphom können Patienten mithilfe von FISH ihre Prognosekategorie ermitteln: gut, mittel oder schlecht. Bei akuter lymphatischer Leukämie (ALL) können genetische Daten der Leukämiezellen Aufschluss über das Krebsrisiko geben und bei der Entscheidungsfindung für die Therapie helfen.
FISH-Panels sind auch für Lymphome, multiples Myelom, plasmazellproliferative Erkrankungen und das myelodysplastische Syndrom verfügbar.6 Beim Mantelzell-Lymphom gibt es zum Beispiel eine Translokation namens GH/CCND1 t (11;14), die häufig mit diesem Lymphom in Zusammenhang steht.
Warum FISH?
Ein Vorteil von FISH ist, dass es nicht an Zellen durchgeführt werden muss, die sich aktiv teilen. Zytogenetische Tests dauern normalerweise etwa drei Wochen, da die Krebszellen etwa zwei Wochen lang in Laborschalen wachsen müssen, bevor sie getestet werden können. Im Gegensatz dazu sind FISH-Ergebnisse normalerweise innerhalb weniger Tage im Labor verfügbar.