Fluorescentie in situ hybridisatie (FISH) is een van de technieken die worden gebruikt om het DNA van uw cellen te doorzoeken, op zoek naar de aanwezigheid of afwezigheid van specifieke genen of delen van genen.
Veel verschillende soorten kanker worden geassocieerd met bekende genetische afwijkingen. En met genetisch bedoelen we niet alleen erfelijkheid. Gedurende een heel leven kunnen cellen fouten maken wanneer ze zich delen en groeien. Mutaties in het DNA die geassocieerd worden met kanker kunnen zich ophopen in deze cellen.
Inhoudsopgave
Hoe het werkt
FISH is een techniek die fluorescerende probes gebruikt om specifieke genen of delen van genen (DNA-sequenties) te detecteren. Laboratoriumpersoneel van medische centra en oncologen gebruiken FISH om patiënten te beoordelen die mogelijk kanker hebben, en soms om een patiënt te monitoren die al is gediagnosticeerd met kanker en is behandeld.
FISH kan worden uitgevoerd met behulp van verschillende soorten monsters, afhankelijk van de locatie en het vermoedelijke type kanker: tumorcellen verkregen uit perifeer bloed, uit een beenmergbiopsie of uit een lymfeklierbiopsie, en in formaline gefixeerd, in paraffine ingebed weefsel (dit verwijst naar een weefselmonster dat in het laboratorium wordt verwerkt en in een soort was wordt ingebed, waardoor het stijver wordt, zodat het in dunne plakjes kan worden gesneden en kan worden gemonteerd voor onderzoek onder de microscoop).
Wat de letters betekenen
De “H” in FISH verwijst naar hybridisatie. Bij moleculaire hybridisatie wordt een gelabelde DNA- of RNA-sequentie gebruikt als probe: visualiseer een rode Lego-steen, als je wilt. De probe wordt gebruikt om een tegenhanger Lego-steen of DNA-sequentie te vinden in een biologisch monster.
DNA in uw specimen is als stapels Lego-stenen, en de meeste stenen in deze stapels komen niet overeen met onze rode probe. En al uw stenen zijn netjes georganiseerd in 23 paar stapels stenen: elke stapel is een van uw gepaarde homologe chromosomen, min of meer. In tegenstelling tot Lego-stenen is onze rode Lego-probe als een sterke magneet en vindt zijn match zonder door de stapels te hoeven sorteren.
De “F” verwijst naar fluorescentie. Onze rode probe zou verloren kunnen raken in de stapels stenen, dus wordt hij gelabeld met gekleurde fluorescerende kleurstof zodat hij oplicht. Wanneer hij zijn match vindt tussen de 23 gepaarde stapels, onthult een fluorescerend label zijn locatie. Dus nu kunt u zien hoe onderzoekers en clinici FISH kunnen gebruiken om te helpen identificeren waar (welke stapel of welk chromosoom) een bepaald gen zich bevindt voor een bepaald individu.
De “I” en de “S” staan voor in situ . Dit verwijst naar het feit dat onze rode Lego-steen op zoek is naar zijn match binnen het monster dat u gaf .
FISH en specifieke bloedkankers
FISH en andere in situ hybridisatieprocedures worden gebruikt om een verscheidenheid aan chromosomale afwijkingen te diagnosticeren: veranderingen in het genetische materiaal, veranderingen in chromosomen, waaronder de volgende:
- Deletie: een deel van een chromosoom is verdwenen
- Translocatie: een deel van een chromosoom breekt af en plakt aan een ander chromosoom
- Inversie: een deel van een chromosoom breekt af en wordt weer teruggeplaatst, maar dan in omgekeerde volgorde
- Duplicatie: een deel van een chromosoom is in te veel kopieën aanwezig in de cel
Elk type kanker kan zijn eigen set chromosomale veranderingen en relevante probes hebben. FISH helpt niet alleen bij het identificeren van de initiële genetische veranderingen in een ziekteproces zoals kanker, maar kan ook worden gebruikt om de respons op therapie en ziekteremissie te monitoren.
De genetische veranderingen die door FISH worden gedetecteerd, bieden soms aanvullende informatie over hoe de kanker van een individu zich waarschijnlijk zal gedragen, op basis van wat in het verleden is waargenomen bij mensen met hetzelfde type kanker en vergelijkbare genetische veranderingen. Soms wordt FISH gebruikt nadat de diagnose al is gesteld, om aanvullende informatie te verzamelen die kan helpen bij het voorspellen van de uitkomst of de beste behandeling van een patiënt.
FISH kan chromosomale afwijkingen in leukemieën identificeren , waaronder chronische lymfatische leukemie (CLL). Bij chronische lymfatische leukemie/kleine lymfocytaire lymfomen kunnen patiënten met FISH hun prognosecategorie achterhalen: goed, intermediair of slecht. Bij acute lymfatische leukemie (ALL) kan de genetica van de leukemische cellen u vertellen over het risiconiveau van kanker en helpen bij het nemen van therapeutische beslissingen.
FISH-panels zijn ook beschikbaar voor lymfoom, multipel myeloom, plasmacelproliferatieve aandoeningen en myelodysplastisch syndroom. In het geval van mantelcellymfoom is er bijvoorbeeld sprake van een translocatie die met FISH kan worden gedetecteerd, genaamd GH/CCND1 t (11;14), die vaak met dit lymfoom wordt geassocieerd.
Waarom VIS?
Een voordeel van FISH is dat het niet hoeft te worden uitgevoerd op cellen die actief delen. Cytogenetische testen duren meestal ongeveer drie weken, omdat de kankercellen ongeveer 2 weken in labschaaltjes moeten groeien voordat ze getest kunnen worden. Daarentegen zijn de FISH-resultaten meestal binnen een paar dagen beschikbaar in het lab.