A hibridização in situ por fluorescência (FISH) é uma das várias técnicas usadas para pesquisar o DNA das suas células, procurando a presença ou ausência de genes específicos ou partes de genes.
Muitos tipos diferentes de câncer estão associados a anormalidades genéticas conhecidas. E por genética, não estamos falando apenas de hereditariedade. Ao longo da vida, as células podem cometer erros quando se dividem e crescem. Mutações no DNA que estão associadas ao câncer podem se acumular nessas células.
Índice
Como funciona
FISH é uma técnica que usa sondas fluorescentes para detectar genes específicos ou partes de genes (sequências de DNA). O pessoal de laboratório do centro médico e oncologistas usam FISH para ajudar a avaliar pacientes que podem ter câncer e, às vezes, para monitorar um paciente que já foi diagnosticado com câncer e tratado.
O FISH pode ser feito usando vários tipos de amostras de acordo com a localização e o tipo de câncer suspeito: células tumorais obtidas do sangue periférico, de uma biópsia de medula óssea ou de uma biópsia de linfonodo e tecido fixado em formalina e embebido em parafina (isso se refere a uma amostra de tecido que é processada em laboratório e embebida em um tipo de cera, tornando-a mais rígida, para que possa ser cortada em seções finas e montada para visualização no microscópio).
O que as letras significam
O “H” em FISH se refere à hibridização. Na hibridização molecular, uma sequência de DNA ou RNA rotulada é usada como uma sonda — visualize um tijolo vermelho de Lego, se preferir. A sonda é usada para encontrar um tijolo de Lego equivalente, ou sequência de DNA, em uma amostra biológica.
O DNA em seu espécime é como pilhas de tijolos de Lego, e a maioria dos tijolos nessas pilhas não corresponderá à nossa sonda vermelha. E todos os seus tijolos estão organizados em 23 pares de pilhas de tijolos — cada pilha é um dos seus cromossomos homólogos pareados, mais ou menos. Ao contrário dos tijolos de Lego, nossa sonda vermelha de Lego é como um ímã forte e encontra sua correspondência sem ter que classificar as pilhas.
O “F” se refere à fluorescência. Nossa sonda vermelha pode se perder nas pilhas de tijolos, então ela é etiquetada com corante fluorescente colorido para que brilhe. Quando ela encontra sua correspondência entre as 23 pilhas pareadas, uma etiqueta fluorescente revela sua localização. Então, agora você pode ver como pesquisadores e clínicos podem usar FISH para ajudar a identificar onde (qual pilha ou qual cromossomo) um gene específico está localizado para um determinado indivíduo.
O “I” e o “S” representam in situ . Isso se refere ao fato de que nosso tijolo vermelho de Lego está procurando por seu par dentro da amostra que você deu .
FISH e cânceres sanguíneos específicos
FISH e outros procedimentos de hibridização in situ são usados para diagnosticar uma variedade de anormalidades cromossômicas — alterações no material genético, alterações nos cromossomos, incluindo o seguinte:
- Deleção: parte de um cromossomo desaparece
- Translocação: parte de um cromossomo se quebra e adere a outro cromossomo
- Inversão: parte de um cromossomo se quebra e se reinsere, mas na ordem inversa
- Duplicação: parte de um cromossomo está presente em muitas cópias dentro da célula
Cada tipo de câncer pode ter seu próprio conjunto de alterações cromossômicas e sondas relevantes. O FISH não apenas ajuda a identificar as alterações genéticas iniciais em um processo de doença como o câncer, mas também pode ser usado para monitorar a resposta à terapia e a remissão da doença.
As alterações genéticas detectadas pelo FISH às vezes oferecem informações adicionais sobre como o câncer de um indivíduo provavelmente se comportará, com base no que foi observado no passado em pessoas com o mesmo tipo de câncer e alterações genéticas semelhantes. Às vezes, o FISH é usado depois que o diagnóstico já foi feito, para coletar informações adicionais que podem ajudar a prever o resultado de um paciente ou o melhor tratamento.
FISH pode identificar anormalidades cromossômicas em leucemias , incluindo leucemia linfocítica crônica (LLC). Para leucemia linfocítica crônica/linfoma linfocítico pequeno, FISH permite que os pacientes descubram sua categoria de prognóstico: bom, intermediário ou ruim. Na leucemia linfoblástica aguda (LLA), a genética das células leucêmicas pode informar sobre o nível de risco de câncer e ajudar a orientar decisões terapêuticas.
Os painéis FISH também estão disponíveis para linfoma, mieloma múltiplo, distúrbios proliferativos de células plasmáticas e síndrome mielodisplásica. No caso do linfoma de células do manto, por exemplo, há uma translocação que o FISH pode detectar, chamada GH/CCND1 t (11;14), que está frequentemente associada a esse linfoma.
Por que FISH?
Uma vantagem do FISH é que ele não precisa ser realizado em células que estão se dividindo ativamente. O teste citogenético geralmente leva cerca de três semanas, porque as células cancerígenas devem crescer em placas de laboratório por cerca de 2 semanas antes de poderem ser testadas. Em contraste, os resultados do FISH geralmente ficam disponíveis no laboratório em poucos dias.